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(GB 5009.202-2016)花生油中8種抗氧化劑的分析方法
發布日期:2019-03-29

前言

食品抗氧化劑是能阻止或延緩食品氧化變質、提高食品穩定性和延長貯存期的食品添加劑。氧化反應不僅會使食品中的油脂變質,而且還會使食品褪色、變色和破壞維生素等,從而降低食品的感官質量和營養價值,甚至產生有害物質,引起食物中毒。

由于合成抗氧化劑化學性質穩定,價格比較優惠且有較好的效果,在預防脂質氧化的方法中,往往被優先考慮,一般使用的合成抗氧化劑有BHA、BHT、TBHQ等。

然而由于這些抗氧化劑不是食品成分之一,而且在食品工業中存在很多違規操作,抗氧化劑的添加往往超出規定的標準,越來越多的研究表明:人工合成的抗氧化劑有一定的毒副作用,有害人們的身心健康,因此對食品中合成抗氧化劑的測定顯得尤為重要。

本實驗建立了高效液相色譜法檢測花生油中8種抗氧化劑的方法。

實驗部分

儀器、試劑與材料

主要儀器設備

高效液相色譜儀(紫外檢測器);博納艾杰爾12位負壓SPE裝置。

試劑材料

乙腈、甲醇為色譜純;實驗用水為超純水,8種抗氧化劑標準品及化學式,CAS號見表1;

表1.食品中8種抗氧化劑中文與英文名稱、CAS號

序號

中文名稱

英文名稱

英文簡稱

CAS號

1

沒食子酸丙酯

Propyl   gallate

PG

121-79-9

2

叔丁基對苯二酚

Tert-butylhydroquinone

TBHQ

1948-33-0

3

去甲二氫愈創木酸

Nordihydroguaiaretic   acid

NDGA

500-38-9

4

叔丁基對羥基茴香醚

Butylhydroxyanisole

BHA

25013-16-5

5

2,6-二叔丁基-4-羥甲基苯酚

2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol

Ionox-100

489-01-0

6

沒食子酸辛酯

Octyl   gallate

OG

1034-01-1

7

2,6-二叔丁基對甲基苯酚

 Butylated   hydroxytoluene

BHT

128-37-0

8

沒食子酸十二酯

Dodecyl   gallate

DG

1166-52-5

一次性無菌注射器;Nylon針式過濾器 (0.22 μm,直徑13 mm) ;

Cleanert S C18-N固相萃取柱:2000 mg/12 mL

樣品制備

樣品提取

稱1 g樣品至50 mL離心管中,加10 mL乙腈,震蕩2 min,超聲10 min,3000 r/min離心5 min,收集上清液至雞心瓶中,再加10 mL乙腈萃取,震蕩2 min,超聲1 min,3000 r/min離心5 min合并上清液。

樣品凈化

先將小柱用5 mL甲醇,5 mL乙腈活化平衡,然后將待凈化液上SPE柱,收集流出液,再用10 mL乙腈︰甲醇=2︰1(V/V)進行洗脫,并收集洗脫液,40℃蒸干,用1 mL乙腈溶解殘留物,過0.22 μm Nylon針式過濾器后待測。

以上凈化步驟可用卓睿全自動固相萃取儀完成。

實驗條件

液相條件

色譜柱:Venusil® XBP C18(L),5 μm,150 ?,4.6 × 250 mm

流動相:A: 0.5%甲酸水溶液;B:甲醇;

流  速:1 mL/min

柱  溫:35℃

進樣量:5 μL

檢測波長:280 nm

流動相梯度見表2

表2.流動相梯度

時間/min

A/%

B/%

0

40

60

15

30

70

25

0

100

30

0

100

31

40

60

35

40

60

結果與討論

實驗結果

由表3可知,采用固相萃取結合液相色譜法檢測食品中8種抗氧化劑,花生油基質加標回收率89% ~ 106%,變異系數小于6.0%,能夠滿足檢測標準要求。

表3. 花生油中8種抗氧化劑加標回收實驗結果

物質名稱

保留時間/min

添加水平/mg/kg

回收率

/%

CV

/%

PG

4.430

171

93.8

4.3

TBHQ

6.058

135

100.6

2.5

NDGA

11.447

121

95.5

5.8

BHA

13.078

213

105.0

3.0

Ionox-100

17.806

141

105.2

2.8

OG

20.920

95

93.5

4.2

BHT

26.506

151

101.3

2.7

DG

26.804

135

89.5

4.3

(GB 5009.202-2016)花生油中8種抗氧化劑的分析方法

圖1. 8種抗氧化劑標準溶液液相色譜圖(標準濃度:PG: 171 μg/mL、TBHQ: 135 μg/mL、NDGA: 121 μg/mL、BHA: 213 μg/mL、Ionox-100: 141 μg/mL、OG: 95 μg/mL、BHT: 151 μg/mL、DG: 135 μg/mL)

(GB 5009.202-2016)花生油中8種抗氧化劑的分析方法

圖2. 花生油基質空白液相色譜圖

圖3. 花生油基質加標液相色譜圖(加標濃度:PG: 171 mg/kg、TBHQ: 135 mg/kg、NDGA: 121 mg/kg、BHA: 213 mg/kg、Ionox-100: 141 mg/kg、OG: 95 mg/kg、BHT: 151 mg/kg、DG: 135 mg/kg)

圖4. 乙腈提取后氮氣吹干油樣殘留(左:1 g油樣;右:凈化后油樣殘留)

結論

本實驗建立了花生油中8種抗氧化劑的檢測方法,并結合高效液相色譜對花生油中8種抗氧化劑含量進行測定。對加標量為PG: 171 mg/kg、TBHQ: 135 mg/kg、NDGA: 121 mg/kg、BHA: 213 mg/kg、Ionox-100: 141 mg/kg、OG: 95 mg/kg、BHT: 151 mg/kg、DG: 135 mg/kg 的花生油樣品,回收率在89% ~ 106%之間,變異系數小于6.0%,符合實驗要求。

附:相關產品

產品名稱

規格描述

包裝數量

訂貨號

Venusil® XBP C18(L)

5 μm,150 ?,4.6 × 250 mm

1支

VX952505-L

Cleanert S C18-N

2000 mg/12 mL

20支/包

S18200012N

Qdaura®卓睿全自動固相萃取系統

4通道

1臺

SPE-40

15位氮吹儀

15位

1臺

NV15-M

保護柱套

適用于4.6 × 10 mm和2.1 × 10 mm

1支

SH-100

直聯式保護柱芯

5 μm,150 ?;4.6 × 10   mm

4支/包

VX950105-LS

1.5 mL樣品瓶

短螺紋透明帶書寫處32 × 11.6 mm

100/pk

1109-0519

1.5 mL樣品瓶蓋

9   mm中心孔藍蓋,紅色橡膠/米色PTFE隔墊45°Shore   A; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

Nylon針式過濾器

單膜,13 mm,0.22 μm

200/pk

AS021320

一次性注射器

2 mL無針頭

100支/包

LZSQ-2ML

應用編號:AF10133

在線客服
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